尊龙凯时在生物医学领域，细胞转染是一项重要的技术，用于将外源基因（如DNA和RNA）导入真核细胞。该技术通过多种化学、生物或物理方法实现，广泛应用于以下几个方面：

研究基因功能：通过转染特定的目的基因，可以实现基因的过表达，进而研究其在细胞功能方面的影响。反之，使用siRNA或shRNA阻断目的基因的表达，能够帮助揭示基因缺失对细胞功能的影响。

蛋白质生产：转染编码目标蛋白的基因，使其表达和纯化。此外，融合荧光蛋白的技术可用于研究目标蛋白在细胞内部的分布与定位。

细胞工程：通过转染与筛选，可以获得稳定表达外源基因的细胞系，进而构建稳转细胞株。

药物筛选与毒性测试：转染特定基因以验证药物靶点的有效性，结合高通量筛选技术，可发现潜在药物。

基因治疗：转染或修复基因，为某些遗传病提供治疗手段，还可以转染编码抗原的基因以进行疫苗研发。

细胞转染的分类

按照核酸在宿主细胞中的存在时间，细胞转染分为瞬转和稳转：

瞬转：外源基因可以表达但不会整合到宿主细胞基因组中，因此会随着细胞分裂逐渐丢失。

稳转：外源基因能够整合到细胞基因组中，伴随细胞的分裂，持续表达，使得转染的后代细胞也能表达该基因。

二者的主要区别在于：

• 目的不同：瞬转旨在短期获得高水平基因表达，而稳转则是为了获得稳定表达的细胞株。
• 稳定性：瞬时转染因基因未整合到染色体中，稳定性差，而稳转经过筛选，基因整合后稳定性较好。
• 方法不同：一般瞬转采用脂质体转染法，而稳转则更偏向于病毒转染或电转等方法。
• 筛选过程：瞬转后通常不需筛选，而稳转需要挑选整合了目标基因的细胞。
• 质粒要求：瞬转质粒通常不需特定抗性，而稳转质粒需带有特定抗性以便后续筛选。
• 表达时效：瞬转的表达通常持续几天，而稳转则可实现长时间的稳定表达。
• 实验周期：瞬转后24小时至96小时收细胞，而稳转可能需要2-3周甚至3-4周的筛选时间。

细胞转染的方法

细胞转染的方法可分为物理介导法、化学介导法和生物介导法：

物理介导法：包括电穿孔和显微注射等，通过物理方式将外源核酸直接导入细胞，通常不需化学物质，但效率高且可能对细胞造成较大损伤。

化学介导法：使用化学物质（如PEI或脂质体）改变细胞膜的性质，增强其对DNA或RNA的亲和力。此法操作简单，周期短，但大多数情况下的表达不够稳固。

生物介导法：利用病毒作为载体，将外源基因包装并导入细胞。这种方法适合长期稳定表达外源基因，具有高效且特异的基因转移能力，但操作较为复杂，周期相对较长。

因此，选择合适的转染方法需考虑实验需求、实验室条件、细胞类型以及转染效率等多种因素。目前，尊龙凯时推荐的主流转染方法包括化学介导的脂质体转染和生物介导的慢病毒转染。质粒转染虽然操作简单，但某些细胞系的转染效率较低，而病毒转染则能够提供稳定的表达能力，适合多种细胞类型，特别是对非分裂型的原代细胞与干细胞，其转染效率更为理想，适用于体内活体动物实验。

我们的公司在常用细胞系和原代细胞中提供慢病毒转染服务，包括转染绿色荧光蛋白（ZsGreen）、红色荧光蛋白（mCherry、RFP）、化学发光LUC以及SV40永生化等服务，形成了近40种稳转细胞系，并可根据需要进行指定细胞的慢病毒转染。

慢病毒转染服务列表

服务编号	转染类别	实验目标	实验周期
SNTS-L001	GFP稳转	获得GFP稳定表达的细胞	3-4周
SNTS-L002	RFP稳转	获得RFP稳定表达的细胞	3-4周
SNTS-L003	mCherry稳转	获得mCherry稳定表达的细胞	3-4周
SNTS-L004	LUC稳转	获得LUC稳定表达的细胞	3-4周
SNTS-L005	SV40永生	获得SV40永生化的细胞（以原代细胞为主）	6-8周